B.将目标基因与基因载体相结合。为使目标基因能顺利进入受体细胞,并能够在受体细胞中复制和表达,必须将目标基因与一种特别的DN A分子基因载体重组
C.重组目标基因的导入。将外源重组目标基因转入到受体细胞中的过程,称为基因导入或基因转移。外源重组目标基因在受体细胞中要能够自主复制、转录、翻译,得以表达。由于受体生物特征的差异以及基因工程目的的不同,基因导入的方法也就不同。主要有转化、转染、电穿孔导入法、基因枪射人法、显微注射法、脂质体介导法等
D.转基因细胞或个体的鉴别与筛选。对被进行了基因转移处理的细胞或个体进行鉴别,以筛选出导入了外源目标基因的转基因细胞或个体
E.对筛选出的转基因细胞或个体进行大量培养,并检测导入的外源基因是否表达。如果以上工作都获得了成功,则基因技术工程就实现了
A.宿主细胞核
B.宿主细胞线粒体
C.宿主细胞浆
D.病毒
E.宿主细胞和病毒
A.基因载体的选择与构建
B.外源基因与载体的拼接
C.重组DNA分子导入受体细胞
D.筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞
E.表达目的基因编码的蛋白质
A.能够在宿主细胞中稳定保存下来并复制,以便提供大量的目的基因
B.具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达
C.具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件
D.能够转载比较大的基因
(1)人体内合成前胰岛素原的细胞是_____,合成胰高血糖素的细胞是_____。
(2)可根据胰岛素原的氨基酸序列,设计并合成编码胰岛素原的_____序列,用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体。再经过细菌转化、筛选及鉴定,即可建立能稳定合成_____的基因工程菌。
(3)用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时,培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,则用该工程菌进行工业发酵时,应从_____中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。